Repozytorium

One-step immunopurification and lectinochemical characterization of the Duffy atypical chemokine receptor from human erythrocytes.

Autorzy

Magdalena Grodecka

Olivier Bertrand

Ewa Karolak

Marek Lisowski

Kazimiera Waśniowska

Rok wydania

2012

Czasopismo

Glycoconjugate Journal

Numer woluminu

29

Strony

93-105

DOI

10.1007/s10719-011-9367-9

Kolekcja

Naukowa

Język

Angielski

Typ publikacji

Artykuł

Streszczenie

Duffy antigen/receptor for chemokines (DARC) is a glycosylated seven-transmembrane protein acting as a blood group antigen, a chemokine binding protein and a receptor for Plasmodium vivax malaria parasite. It is present on erythrocytes and endothelial cells of postcapillary venules. The N-terminal extracellular domain of the Duffy glycoprotein carries Fy(a)/Fy(b) blood group antigens and Fy6 linear epitope recognized by monoclonal antibodies. Previously, we have shown that recombinant Duffy protein expressed in K562 cells has three N-linked oligosaccharide chains, which are mainly of complex-type. Here we report a one-step purification method of Duffy protein from human erythrocytes. DARC was extracted from erythrocyte membranes in the presence of 1% n-dodecyl-β-D-maltoside (DDM) and 0.05% cholesteryl hemisuccinate (CHS) and purified by affinity chromatography using immobilized anti-Fy6 2C3 mouse monoclonal antibody. Duffy glycoprotein was eluted from the column with synthetic DFEDVWN peptide containing epitope for 2C3 monoclonal antibody. In this single-step immunoaffinity purification method we obtained highly purified DARC, which migrates in SDS-polyacrylamide gel as a major diffuse band corresponding to a molecular mass of 40-47 kDa. In ELISA purified Duffy glycoprotein binds anti-Duffy antibodies recognizing epitopes located on distinct regions of the molecule. Results of circular dichroism measurement indicate that purified DARC has a high content of α-helical secondary structure typical for chemokine receptors. Analysis of DARC glycans performed by means of lectin blotting and glycosidase digestion suggests that native Duffy N-glycans are mostly triantennary complex-type, terminated with α2-3- and α2-6-linked sialic acid residues with bisecting GlcNAc and α1-6-linked fucose at the core.

Słowa kluczowe

Duffy antigen, Immunopurification, Chemokine receptor, Glycoproteomic, N-glycans, Lectins

Adres publiczny

http://dx.doi.org/ 10.1007/s10719-011-9367-9

Strona internetowa wydawcy

http://link.springer.com

Podobne publikacje
2019

Synthesis and pharmacological evaluation of hybrids targeting opioid and neurokinin receptors.

Wtorek Karol, Adamska-Bartłomiejczyk Anna, Piekielna-Ciesielska Justyna, Ferrari Federica, Ruzza Chiara, Kluczyk Alicja, Piasecka-Zelga Joanna, Calo Girolamo, Janecka Anna

2017

Design and characterization of opioid ligands based on cycle-in-macrocycle scaffold.

Adamska-Bartłomiejczyk Anna, De Marco Rossella, Gentilucci Luca, Kluczyk Alicja, Janecka Anna

2015

Study of conversion of polymeric organophosphorus ylide complexes of mercury(II) halides to phenazine complexes: X-ray crystal structures and spectral characterizations.

Dadrass Alireza, Rahchamani Hojjatollah, Khalafy Jabbar, Ramazani Ali, Habashi Bayram Parsa, Marjani Ahmad Poursattar, Souldozi Ali, Ślepokura Katarzyna, Lis Tadeusz, Rouhani Morteza

  • 20
    Styczeń 2021
    12:00

    Publiczna obrona pracy doktorskiej mgr Klaudii Mencel

    zdalnie (MS Teams)
  • 10
    Listopad 2020
    10:15

    Zaproszenie na 4. nadzwyczajne posiedzenie Rady Wydziału

    zdalnie
  • 27
    Październik 2020
    10:15

    Zaproszenie na 6. posiedzenie Rady Wydziału w dniu 27 października

    Wrocław, dnia 21 października 2020 r.          ZAPROSZENIE Uprzejmie zapraszam na 6. posiedzenie Rady Wydziału, które odbędzie się dnia 27 października 2020 r.  o  godz. 10.15    (tryb zdalny)   Porządek dzienny: 1. ...

    zdalnie
  • 08
    Październik 2020
    10:15

    11. Posiedzenie Rady Dyscypliny Naukowej

    ZAPROSZENIE Uprzejmie zapraszam na 11. posiedzenie Rady, które odbędzie się dnia 8 października 2020 r. o godz. 10:15 w trybie zdalnym   Porządek dzienny:Sprawy osobowe Powołanie promotora rozprawy doktorskiej pani mgr Pauliny Trombik ...

    zdalnie
  • 30
    Wrzesień 2020
    01:00

    Publiczna obrona rozprawy doktorskiej mgr Stanisławy Tarnowicz-Ligus

    zdalnie